Trong Resident Evil 5, Alice tỉnh dậy ở trung tâm hoạt động kín đáo nhất của Tập đoàn Umbrella. Khi đào sâu vào những bí mật của họ, cô phát hiện ra nhiều quá khứ kỳ lạ của chính mình. Alice và những người bạn tiếp tục săn tìm những kẻ chịu trách nhiệm làm cho dịch bệnh bùng phát trên khắp thế giới.
Trong cuộc chiến lần này Alice phải đối đầu với Jill Valentine, đồng nghiệp cũ đã bị Tập đoàn Umbrella biến thành kẻ thù của cô. Resident Evil 5 tràn ngập những cảnh hành động hoành tráng, những màn tung quyền cước sởn gai ốc. Đặc biệt, kỹ thuật quay chậm còn gia tăng mức độ rùng rợn, nhất là khi Alice suýt bị vũ khí của Jill đâm thẳng vào mắt.
